各種固定用緩衝液が与える電子顕微鏡像への影響

生物学的あるいは生化学的な緩衝液を使用して作製された電子顕微鏡試料と従来の電子顕微鏡用として使用されている緩衝液で作成した試料とで電子顕微鏡像から比較検討した。HEPES緩衝液で作製した試料の電子顕微鏡像は、従来の電子顕微鏡に用いられている緩衝液で作製した試料から得られた電子顕微鏡像と非常によく似た像を示し、このHEPES緩衝液は電子顕微鏡の固定用緩衝液として使用できることが認められたが、その他（PIPES、MOPS緩衝液）の緩衝液ではあまりにも細胞内の可溶性物質が溶出しすぎて使用に耐えなかった。電子顕微鏡学研究において使用されうる固定用緩衝液は細胞内のオルガネラの保持が余りにも良い場合には、その微細構造の解析が困難になり、程々に細胞内の可溶性物質が溶出した方が解析がし易くなると思われ、この様な観点から、今回使用したHEPES緩衝液は生物学的あるいは生化学的な研究から引き続き電子顕微鏡用の試料を作製する際、同じ緩衝液が使用できることが認められた。

The effects of buffers fixating biological or biochemical materials on the ultrastructures of intracellar organera were examined in electron microscopic observations. HEPES buffers were evaluated for retention of the ultrastructures intracellular organella in comparison with PIPES, and MOPS buffers. It has been shown that the image of electron microscopic observations resembled closely to ordinary fixating buffers (Millonig, Sorencen, and cacodylate buffers) for electron microscopic materials. On PIPES buffers, the image of electron microscopic observations was indistinct because too much intracellular soluble sabstances were remained in cells. On the electron microscopic study, it may be suitable to make materials adequately permeable by removing intracellular soluble substances with buffers. In this point of view, HEPES buffers can be used as a fixating buffer in electron microscopic observations.